Glucemia, insulinemia y secreción de insulina en ratas hembras prepúberes hiperandrogenizadas e hiperestrogenizadas / Glycemia, insulinemia and secretion of insulin in hyperandrogenized and hyperestrogenized prepuberal rats

En trabajos publicados previamente, realizados con distintos modelos experimentales de ratas, se halló una asociación entre la hiperandrogenización y la resistencia a la insulina caracterizada por hiperinsulinismo que, en ocasiones, se acompañaba de un deterioro de la tolerancia a la glucosa. Para obtener información adicional sobre el efecto de los esteroides sexuales sobre los mecanismos de regulación de la glucemia, se estudió el efecto de la administración de dosis altas de enantato de testosterona y de benzoato de estradiol en ratas hembras prepúberes, sobre el comportamiento de la glucemia y la insulinemia in vivo, durante una prueba de tolerancia a la glucosa. Adicionalmente se exploró in vitro, la capacidad de secreción de insulina estimulada por glucosa de los islotes de Langerhans de estas ratas hiperandrogenizadas e hiperestrogenizadas. Se encontró que la hiperandrogenización se acompañaba de un estado de resistencia a la insulina caracterizado por hiperinsulinemia, que se correspondía con un aumento de la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans. Sin embargo, la hiperestrogenización de estas ratas prepúberes hembras no produjo cambios en los perfiles de la glucemia, de la insulinemia ni en la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans estimulados con concentraciones de glucosa cercanos al rango fisiológico. Se concluyó que en este modelo experimental la hiperandrogenización produce un deterioro de la sensibilidad a la insulina(AU)

In previously published studies conducted with different experimental models of rats, it was found an association between hyperandrogenization and insulin resistance characterized by hyperinsulinism that, on occasions, was accompanied by glucose tolerance deterioration. To obtain additional information on the effect of sexual steroids on the glycemia regulation mechanisms, it was studied the effect of the administration of high doses of testosterone enanthate and of estradiol benzoato in prepuberal rats on the behavior of glycemia and insulinemia in vivo during a glucose tolerance test. Besides, it was explored in vitro the capacity of the islets of Langerhans of these hyperandrogenized and hyperestrogenized rats for secreting insulin stimulated by glucose. It was found that hyperandrogenization was accompanied by a state of insulin resistance characterized by hyperinsulinemia that corresponded to an increase of the capacity of the islets of Langerhans to secrete insulin. However, the hyperestrogenization of these prepuberal rats did not produce changes either in the profiles of glycemia and insulinemia or in the capacity of the islets of Langerhans to secrete insulin stimulated by glucose concentrations near the physiological range. It was concluded that hyperandrogenization produces a deterioration of sensitivity to insulin in this experimental model(AU)

Glucemia, insulinemia y secreción de insulina en ratas prepúberes hiperandrogenizadas e hiperestrogenizadas / Glycemia, insulinemia and insulin secretion in prepubescent rats receiving high doses of androgens and strogens

Se estudió el efecto de una sobredosis de enantato de testosterona y de benzoato de estradiol en ratas machos prepúberes, sobre el comportamiento de la glucemia y la insulinemia in vivo, durante una prueba de tolerancia a la glucosa. Adicionalmente se exploró, in vitro, la capacidad de secreción de insulina estimulada por glucosa de los islotes de Langerhans de estas ratas hiperandrogenizadas e hiperestrogenizadas. Se encontró que la hiperandrogenización se acompañaba de un deterioro de la sensibilidad a la insulina, con hiperinsulinemia, que no se corresponde con un aumento de la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans. Sin embargo, se comprobó que la hiperestrogenización no indujo cambios en los perfiles de glucemia, ni de insulinemia, ni en la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans de este grupo de ratas hiperestrogenizadas(AU)

The effect of an overdose of testosterone heptanoate and estradiol in male prepubescent rats on the behavior of glycemia and insulinemia was studied in vivo during a glucose tolerance test. The capacity of insulin secretion stimulated by glucose from the islets of Langerhans of these rats that were administered a high dose of androgens and estrogens was explored in vitro. It was found that the high level of circulating androgens was accompanied by a deterioration of sensitivity to insulin with hyperinsulinemia that does not correspond to an increase of the insulin secreting capacity of the islets of Langerhans. However, it was demonstrated that the high level of circulating estrogens did not produce changes either in the glycemia and insulinemia profiles or in the insulin secreting capacity of the islets of Langerhans in this group of rats that received an elevated dose of estrogens(AU)

Glucemia, insulinemia y secreción de insulina en ratas hipoandrogenizadas e hiperandrogénicas / Glycaemia, insulinemia and insulin secretion in hypoandrogeniced and hyperandrogenic rats

Se estudió, en ratas machos adultas, el efecto de la castración y de una sobredosis de enantato de testosterona sobre las modificaciones de la glucemia y la insulinemia in vivo, durante una prueba de tolerancia a la glucosa (PTG), e in vitro, la capacidad de secreción de insulina estimulada por glucosa de los islotes de Langerhans de estas ratas hipoandrogenizadas e hiperandrogenizadas. Se consideró que la castración se acompañaba de un incremento en la sensibilidad a la insulina, sin deterioro de la capacidad de secreción de insulina de los islotes. Sin embargo, se comprobó que la hiperandrogenización estaba asociada al desarrollo de una insulinorresistencia caracterizada por hiperinsulinemia; se observó además un aumento de la capacidad de secreción de insulina en este grupo de ratas hiperandrogenizadas(AU)

Metodología preparativa y analitica para estandarizar y validar un sistema ELISA para cuantificar IgG de ratón / Preparative and analytical methodology to standardize and validate an ELISA system to quantify mouse's IgG

Se purificó IgG de ratón por precipitación salina, seguido de una cromatografía de intercambio iónico, con el objetivo de desarrollar un método analítico que permitiera cuantificar anticuerpos monoclonales de origen murino. El producto fue utilizado para producir un anticuerpo policlonal en carnero. Se siguió un esquema de inmunización de varios meses con la utilización de adyuvantes, completo e incompleto, de Freund para lograr anticuerpos de alta afinidad. Se purificaron los lotes de antisueros seleccionados por cromatografía de inmunoafinidad mediante una matriz de IgG de ratón-Sepharose CL-4B. Los anticuerpos anti-IgG de ratón purificados fueron conjugados con peroxidasa de rábano picante y además, utilizados como recubrimiento. Se estandarizó un método ELISA tipo sandwich que barre un rango dinámico de 31,25-500 ng/mL. Se estudió la exactitud mediante la evaluación de la linealidad, el paralelismo y la comparación con un método de referencia y la precisión, según la repetibilidad y la reproducibilidad. Se concluyó que el sistema estandarizado cumple con los requisitos analíticos para cuantificar IgG de ratón

Validación retrospectiva del proceso de purificación del anticuerpo monoclonal Inmunoglobulina Anti-gonadotropina coriónica humana / Retrospective validation of the purification process of immunoglobulin anti-human chorionic gonadotropin monoclonal antibody

Con el objetivo de verificar que el proceso de purificación del anticuerpo monoclonal (AcM) IG1 antigonadotropina coriónica humana (hCG) se mantenía operando bajo condiciones controladas que garantizaban la calidad del producto se llevó a cabo la validación retrospectiva del mismo. Se analizaron los resultados de 21 procesos cromatográficos sucesivos en protein A-Sepharose CL-4B. Se evaluaron los parámetros: recuperación, pureza y actividad inmunológica del producto. Se comprobó, según la información recopilada, que la recuperación estuvo en el rango de 90-98, 16 porciento, con un valor promedio 93,19 porciento, una desviación estándar de 2,70 y un coeficiente de variación de 2,90 porciento, la pureza entre 90 y 99,3 porciento con un valor promedio de 95,48 porciento, una desviación estándar de 2,47 y un coeficiente de variación de 2,59 porciento y la actividad inmunológica determinada por radioinmunoensayo y expresada como ng de hormona marcada unida por milígramos de anticuerpos entre 4,013 y 6,210 ng de hCG marcada unida por mg de AcM, con un valor promedio de 4,72, una desviación estándar de 0,60 y un coeficiente de variación de 12,75 porciento. Se concluyó que el proceso se encontraba transcurriendo bajo las condiciones diseñadas de forma reproducible, lo cual garantiza la calidad del AcM